“进化是生命的标志”——由基因突变和自然环境选择共同编织的漫长史诗。在当今的生命科学领域，我们正尝试通过定向进化，来模仿并加速这一过程。

那么，如何加速这一进化过程？答案就藏在基因突变文库中。

定点饱和突变文库采用特定简并引物（如NNK）引入突变，产生32种不同的密码子，包括氨基酸、终止密码子和同义密码子。尽管存在氨基酸比例分布不均的情况，但这种筛选方式能快速、低成本地获得高度多样的突变体，有助于蛋白质改造和研究蛋白结构与功能之间的关系。

Trimer组合突变文库以氨基酸作为一个单元进行突变，以扩大突变范围。通过针对序列进行设计，可以灵活指定氨基酸的种类和比例，避免不必要的同义密码子和氨基酸，解决了密码子偏移、移码突变和控制终止密码子掺入等问题，同时显著提高了文库的均一性、覆盖性和多样性。

定点饱和突变文库（Site-Saturation Mutagenesis Library）和Trimer组合突变文库（Combinatorial Mutagenesis Library）是两种各具特色的工具。前者实现单点氨基酸的精确突变，后者实现多点多种氨基酸的精确突变。它们如同生命进化的加速器，让我们能够更精准、更高效地探索生命的奥秘。

蛋白定向进化

• 蛋白质工程：通过精确调控目标蛋白关键氨基酸的突变，构建具有特定功能或性质的蛋白质变体，调节蛋白质活性、稳定性和亲和性，以适应不同应用场景需求。
• 新功能发现：引入多样氨基酸变异以发现新蛋白功能，如催化新反应、结合新配体等，促进蛋白功能性筛选和进化。
• 抗药性研究：模拟药物压力可筛选对抗药物具耐受性的突变体，揭示药物抗性机制，为优化药物治疗提供指导。

抗体开发

• 增强亲和力：引入特定氨基酸变异可改变抗体与靶标分子结合亲和力，提高治疗效果和选择性。
• 改善稳定性：调整抗体结构可增强体内稳定性和半衰期，延长药效持续时间、减少剂量频率，提高患者治疗便利性。
• 降低免疫原性：避免或减少抗体与人类免疫系统相抗原的位点，降低免疫原性和产生不良反应风险，使抗体更适合临床治疗。

药物靶点筛选

• 靶点发现：精准控制和定向突变已知靶点特定区域，产生具有新结构和功能特性的变体，为新药物靶点发现提供工具和平台。
• 靶点验证：整突变体中各氨基酸比例和组合，覆盖和测试多种功能性质，全面评估不同突变体的活性、亲和性、稳定性等重要性质。
• 药物筛选：高通量筛选大量不同序列蛋白质变体，找到与特定药物高亲和力的靶点，加速药物筛选，提高药物发现效率。

泓迅生物先进设计和制造提供Trimer文库一站式解决方案，已成功交付了数百个高品质、定制化的突变文库。精准控制CDR区域的每个突变位点，调整氨基酸种类和比例，提升文库的准确度和实验的成功率，正确率最高可达90%以上。降低后期筛选难度，节省时间和精力，享受高性价比服务。

泓迅生物利用最前沿的密码子优化技术，每条Trimer引物可插入多达20个突变位点，确保您在后续实验中获得更广泛的变异选择，提升实验的多样性和便捷性。

References
[1] Prassler, Josef, et al. "HuCAL PLATINUM, a synthetic Fab library optimized for sequence diversity and superior performance in mammalian expression systems." Journal of molecular biology 413.1 (2011): 261-278.
[2] Chembath, Anupama, et al. "Nondegenerate Saturation Mutagenesis: Library Construction and Analysis via MAX and ProxiMAX Randomization." Directed Evolution: Methods and Protocols. New York, NY: Springer US, 2022. 19-41.